鲜白扁豆白扁白扁花和干冻干豆花豆花的成指纹图谱气相基于技术研究一分

白扁豆花是基于技术豆科扁豆属植物扁豆Dolichos lablab L.的干燥花，呈扁平不规则三角形，气相具有解暑化湿、指纹和中健脾之功效，图谱用于治疗痢疾、研究泄泻、鲜白赤白带下等症，扁豆扁豆扁豆在我国具有悠久的花冻花和花应用历史。经典名方“新加香薷饮”中采用的干白干白是鲜白扁豆花，而有的成分则采用的是干扁豆花，两者内在成分的基于技术差异可能决定了其药效的差异。本项研究的气相目的在于研究鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和晒干白扁豆花的指纹成分差异，为冻干扁豆花替代鲜扁豆花提供科学的图谱数据支持，同时，研究通过气相质谱(GC-MS)方法对鲜白扁豆花的挥发性化学成分进行鉴定，这些挥发性成分的鉴定，为白扁豆花的药理和临床应用提供基础支持。

1 材料

1.1 仪器与试剂

Agilent7890B气相(GC)色谱仪，Agilent 7890B-7000C GC-MS联用仪(配有Mass Hunter质谱工作站， NIST 14标准谱库),中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版本；甲醇(色谱纯)。

1.2 样品

白扁豆花采自于河北中医学院药草园，白扁豆种子经河北中医学院王乾老师鉴定为Dolichos lablab L.的种子。

2 方法与结果

2.1 样品的处理

2.1.1 鲜白扁豆花：

摘取鲜白扁豆花立即置于-80℃低温冰箱中，冷冻，而后于液氮中研碎，称取1 g, 加入25 mL容量瓶中，加入15 mL甲醇，回流30 min, 放冷至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，过0.45 μm滤膜，进样1 μL 进行测定。

2.1.2 冻干白扁豆花：

摘取鲜白扁豆花立即置于-80 ℃低温冰箱中，而后于冷冻干燥机内冻干，研碎，称取1 g, 加入25 mL容量瓶中，加入15 mL甲醇，回流30 min, 放冷至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，过0.45 μm滤膜，进样1 μL 进行测定。

摘取鲜白扁豆花，晒干，研碎，称取1 g, 加入25 mL容量瓶中，加入15 mL甲醇，回流30 min, 放冷至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，过0.45 μm滤膜，进样1 μL 进行测定。

2.2 GC色谱条件

2.2.1 GC色谱指纹图谱条件：

DB-1毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);程序升温：柱初始温度为80 ℃,以10 ℃ /min的速率升至300 ℃,保持10 min; 进样口温度：300 ℃;载气：N2;载气流速：1 mL/min; 分流比：20 ∶1。

2.2.2 GC-MS色谱条件：

色谱柱、升温程序同GC色谱指纹图谱条件；载气：He; 载气流速：1 mL/min; 分流比：100 ∶1。EI离子源；离子源温度：230 ℃;四极杆温度：150 ℃;电子能量：70 eV;接口温度：280 ℃;质量范围：50～600 m/z。

3 结果与讨论

3.1 方法学研究

主要针对进样精密度、样品重复配制后的重复性以及样品溶液的稳定性进行研究，以鲜扁豆花为研究对象，将所得的图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版),通过各色谱图之间相似度比值，进而确定方法的适用性。本方法的精密度、重复性和稳定性研究相似度均在0.99以上，说明方法适用性良好。

3.2 各类白扁豆花成分的差异

对鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和干扁豆花的成分进行分析，每个种类的样品分别重复检测3次，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)对结果进行分析。分析结果见图1、表1。

从图1的结果可以看出，鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和干白扁豆花种类内部之间，差异较小，说明该方法的重现性较好；鲜白扁豆花和冻干白扁豆花之间的相似度在0.950以上，说明相似度非常接近；鲜白扁豆花和干白扁豆花之间的相似度在0.720左右，有较大的差异。根据气相图谱可以看出，鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和干扁豆花之间成分的种类并无显著的差异，仅是成分的含量差异较大。从提取溶液的颜色来看，鲜白扁豆花和冻干白扁豆花为绿黄色，而干白扁豆花为浅黄色。

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